国际肺癌研究协会免疫组化诊断图谱——7甲状腺转录因子-1

abin 华夏病理 2024-04-03 7192 评论

介绍

甲状腺转录因子-1（TTF1）是一种38kDa核蛋白，属于同源结构域转录因子的NKX2-1基因家族。TTF1由染色体14q13上NKX2-1基因编码。它是肺和甲状腺腺的发育所必需的。在正常肺，TTF1刺激club细胞（旧称Clara细胞）分泌蛋白和肺特异性表面活性蛋白的产生，并表达于II型肺细胞和club细胞的核，提供有用的阳性内对照。TTF1是临床实践中最有用和最广泛使用的抗体之一。它常用于两大临床场景，即，原发性肺腺癌与其他原发部位癌的区别，以及在形态学不确定的非小细胞癌（NSCC）中肺腺癌与鳞癌的鉴别。两大场景都需要TTF1染色的特异性，并涉及适当的敏感性。此外，在精准医疗的时代，确定肺/非肺起源和区分肺腺癌/鳞癌对于晚期NSCC患者的临床管理和指导治疗决策具有至关重要的意义。冒着说废话的风险，病理学家要记住TTF1在甲状腺上皮性肿瘤中广泛表达。在高达90%的小细胞肺癌、2/3的大细胞NE癌和梭形细胞类癌中也发现TTF1表达（见第6章）。

本章探讨TTF1在区分肺腺癌和肺外腺癌方面的关键作用，特别是小活检；以及腺癌和鳞癌的区分，重点是最广泛使用的TTF1克隆号之间的染色差异，以及判读TTF1阳性所需的及TTF1染色程度。TTF1免疫染色的分析前因素也会讨论。

肺腺癌中不同TTF1克隆号之间是否有染色差异？

商用的TTF1克隆号有多种，包括兔多抗和羊多抗；小鼠单抗，包括8G7G3/1、SPT24、BGX-397A、SMP150和5S143克隆号；以及兔单抗，包括SP141、EP15844、C12-I和G21-G克隆号。然而，小鼠单抗8G7G3/1和SPT24以及最近可用的兔单抗SP141是临床实践中应用最广泛的，因此以它们为重点。

首先观察不同的克隆号在检测肺腺癌的敏感性和特异性。一项综述中，76.7%的肺腺癌病例呈8G7G3/1克隆号阳性，81.3%的肺腺癌病例呈SPT24克隆号阳性。三种广泛使用的TTF1克隆号相互比较，89%的肺腺癌呈8G7G3/1阳性,93%呈SPT24阳性，和93%呈SP141阳性，以1%染色作为截断值用于判读阳性。这些结果强调8G7G3/1克隆号对肺腺癌的检测敏感性低于SPT24和SP141克隆号（图7-1）。

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图7-1 非肿瘤性肺组织（A～C：周围肺实质，C～F：细支气管上皮）和实体腺癌（G～I）中的TTF1染色。左列（A、D、G）为8G7G3/1，中列（B、E、H）为SPT24；右列（C、F、I）为SP141。由于检测系统和扩增程序不同（8G7G3/1用Dako Flex系统；SPT24和SPT24141用OptiView DAB IHC检测试剂盒），染色强度也不同。然而，在外周肺实质和腺癌中的阳性分布相同，而在细支气管上皮中的染色程度不同。

关于肺腺癌与肺外原发腺癌的区别，研究发现，肺外原发腺癌有少数呈TTF1阳性。这些部位包括女性生殖道（图7-2）、乳腺、结肠和胃，SPT24的染色百分比高于8G7G3/1（表7-1）。值得注意的是，与8G7G3/1克隆号相比，SPT24克隆号与TTF1蛋白质结合可能更强，导致更均匀的核阳性和更少的预期之外的细胞质染色。8G7G3/1可以显示肝细胞和肝细胞癌的细胞质非特异性染色。假设SPT24的结合更强，也可以解释它在肺外腺癌中染色增加（与8G7G3/1相比）。此外，一些非肿瘤性支气管基底细胞也能染SPT24；因此，使用SPT24时，要注意区分肿瘤细胞与非肿瘤细胞的阳性染色，特别是当组织严重破碎时（图7-3）（参见第5章）。较新SP141的染色性能研究尚少，然而，现有的研究似乎都表明，SP141与SPT24相似，对肺腺癌的特异性低于8G7G3/1（表7-2）。

国际肺癌研究协会免疫组化诊断图谱——7甲状腺转录因子-1 图7-2卵巢癌转移至肺，TTF1表达。肿瘤细胞显示SPT24和8G7G3/1均呈阳性。妇科肿瘤表达FFT1，可能是转移性和原发性肺腺癌的鉴别诊断陷阱。

表7-1肺外（包括女性生殖道、乳腺、结肠和胃等）原发肿瘤中TTF1的表达结果

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国际肺癌研究协会免疫组化诊断图谱——7甲状腺转录因子-1 图7-3 A：非肿瘤性支气管上皮片段，B：克隆号SPT24阳性，C：克隆号8G7G3/1阴性，D： p40阳性细胞与SPT24阳性细胞重叠，提示支气管基底细胞呈SPT24阳性。

关于肺腺癌和鳞癌的鉴别，研究发现少数肺鳞癌病例表达TTF1。相比之下，SPT24阳性率较高，而8G7G3/1阳性率很低或阴性（表7-2，图7-4）。另一研究中，SP141也呈低阳性，而8G7G3/1均阴性（表7-3）。鉴于TTF1 IHC的重要作用，现已成为WHO分类中低分化腺癌的定义性特征，不同抗体克隆号的性能差异变得更加重要（见章节6）。另外发现，使用信号放大系统（催化信号放大[CSA]-II检测系统）后，肺鳞癌SPT24阳性率增加，作者建议有可能区分肺原发性鳞癌与头颈等部位原发的鳞癌。这种方法可用于临床实践前还需要更多研究数据。

表7-2 结肠和前列腺等非肺原发腺癌中3种克隆号TTF1表达结果

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国际肺癌研究协会免疫组化诊断图谱——7甲状腺转录因子-1 图7-4 A：HE染色示高分化鳞癌。B：SPT24阳性。C：8G7G3/1阴性或弱阳性。

表7-3 不同研究中肺鳞癌对3种克隆号TTF1表达结果

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a EnVision Dako

b 相同的连续病例，直接比较8G7G3/1与SPT24

c CSA-II Roche

总的来说，现有的文献似乎表明，在两大使用场景中，与SP141和SPT24相比，8G7G3/1对肺腺癌检测的特异性较高。

答：鉴别肺腺癌，8G7G3/1最特异。

什么程度的TTF1染色判读为阳性检测结果？

在两大使用场景中，公认TTF1局灶染色视为阳性。然而，这提出了局灶染色的问题，即，1%、10%还是50%？不同克隆号是否对此有任何影响？

对8G7G3/1和SPT24的研究表明，它们使用相同的阳性阈值时，在所有阈值之间均存在显著差异，导致8G7G3/1在较高的阈值时敏感性较低，SPT24在较低的阈值时特异性较低。确定每个克隆号的最佳阈值（8G7G3/1>5%，SPT24>50%）后，两种克隆号的敏感性或特异性没有显著差异（图7-5）。

国际肺癌研究协会免疫组化诊断图谱——7甲状腺转录因子-1 图7-5 在低分化癌中,即使克隆号8G7G3/1只有这种染色程度（B)，也判读为TTF1阳性。

一项研究针对非鳞状细胞肺癌与肺鳞癌和肺转移癌的区分，认为8G7G3/1和SPT24的最佳阈值是1%，而SPT24最佳阈值是10%。区分肺腺癌与其他肺癌和肺转移癌时，8G7G3/1的最佳阈值不变（1%），其余二种最佳阈值必需上调（SPT24 10%，SP141 50%）。

因此，3种最广泛使用的克隆号对判读为TTF1阳性所需的局灶染色量似乎是不同的（图7-1）。8G7G3/1特异性好，判读为TTF1阳性所需的最佳阈值远低于SPT24和SP141，后二者敏感性好。在实际应用中，当使用8G7G3/1克隆号时，任何染色范围、任何染色强度都可以判读为“阳性”，特别是在小活检。

答：TTF1局灶性染色即可判读为阳性，在适当的临床背景下提示肺腺癌；然而，不同克隆号具有不同的最佳阈值。