非小细胞肺癌诊断及预测性免疫组化指标概览（三）

强子华夏病理 2019-02-27 1708 评论

[导读] 编译整理：强子

NSCLC中的新型预测性标志物

免疫组化可用于BRAF V600E、RET、pan-TRK、LKB1异常的检测；ERBB2及MET异常的改变包括了激活突变和基因扩增，其检测主要方法为分子学，免疫组化价值有限。

1. BRAF

肺腺癌中约3-5%具有BRAF突变，患者大部分为吸烟者。NSCLC中的BRAF突变约50%为BRAF V600E，且与微乳头状组织学表现相关。BRAF V600E突变肺腺癌患者可通过利妥昔单抗（trametinib）和达拉非尼（dabrafenib）进行联合抑制。目前BRAF V600E突变特异性抗体VE1（SpringBio公司产品）已在恶性黑色素瘤、甲状腺乳头状癌、结直肠腺癌中进行了评估。BRAF V600E免疫组化一般认为与分子检测结果一致，但其临床意义还是很大程度取决于肿瘤类型。有两项针对肺腺癌中VE1抗体检测BRAF V600E突变的研究表明，其敏感性和特异性分别≥90%、≥95%。目前BRAF免疫组化检测用于指导治疗方面，尚需更多研究。

2. RET

RET异常最初是在部分甲状腺乳头状癌中进行研究的，NSCLC中RET重排为1%至2%，大部分情况下是和KIF5B融合，另外还有些其他的融合方式。RET重排的NSCLC主要见于年轻的非吸烟者，但年龄分布可非常广泛。RET重排的部分NSCLC患者中，多靶点激酶抑制剂卡博替尼（cabozantinib）或凡德他尼（vandetanib）已证实有临床获益。从组织学来说，RET重排NSCLC主要为腺癌，文献中也有2例腺鳞癌的报道。RET重排与伴明显核内假包涵体、砂粒体状钙化的乳头状生长、腺泡状生长有关。也有研究称和伴印戒样细胞的实性或筛状生长有关，这一点则类似ALK重排或ROS1重排的腺癌。

RET重排的评估主要是分子检测或断裂探针FISH检测。免疫组化检测方面，有一项用Abcam公司克隆号为EPR2871抗体的研究称其敏感性100%，特异性83%；其他用该抗体、或Leica公司克隆号为3F8的抗体研究则结果令人失望，敏感性和特异性均不理想。因此目前对于NSCLC中RET重排的检测来说，尚需更多研究来评估免疫组化的可能意义及最佳检测方案。

3. Pan-TRK

神经酪氨酸激酶1（neurotrophic tyrosine kinase 1，NTRK1）重排在肺腺癌中罕见，仅为0.1%，在无已知癌基因驱动的NSCLC患者也仅为3%左右。NTRK致癌性融合导致TRK信号通路结构性变化，不同组织学亚型的NTRK重排肺腺癌中通过larotrectinib靶向抑制TRK是有效果的。Abcam公司克隆号为EPR17341的抗体pan-TRK可识别TRK蛋白的C末端序列，已用于NTRK融合的检出及证实。尽管NTRK重排肺腺癌的临床及组织学特征尚未完全明了，但通过二代测序和/或免疫组化的方法确定肺腺癌有无NTRK重排以指导患者进行TRK靶向治疗方面的应用却是越来越多了。

4. 未来方向：STK11/LKB1、ERBB2/HER2、MET

STK11/LKB1突变可见于约30%的肺腺癌，与进展期NSCLC患者免疫治疗获益缺失有关；吸烟患者中常同时存在KRAS突变。Abcam公司克隆号为Ley37D/G6的抗体检测出LKB1缺失，预示着KRAS突变患者常出现转移等侵袭性行为。早期研究表明STK11等位失活和LKB1免疫组化结果之间有较好的一致性，但不同病例间LKB1的表达可能会有自局灶缺失、至完全缺失的异质性。鉴于LKB1失活的机制有很多，因此LKB1抗体免疫组化检测STK11改变的敏感性和特异性数据还很有限。

非小细胞肺癌诊断及预测性免疫组化指标概览（三）图7. 实性结构为主的低分化肺腺癌，免疫组化LKB1表达缺失。

NSCLC中ERBB2/HER2异常也包括了突变和扩增。20号外显子移码插入突变可见于1%至4%的NSCLC，主要见于非吸烟者、腺癌。ERBB2跨膜结构域激活突变也有提及，并因此导致HER2受体二聚体出现改变、阿法替尼（afatinib）的疗效改变。相反，ERBB2扩增可见于1%至3%的NSCLC患者，包括了对靶向治疗耐药的部分EGFR突变型NSCLC患者。ERBB2激活突变与拷贝数之间并无一致相关性。NSCLC患者中ERBB2突变或扩增主要通过分子方法进行检测，尚无免疫组化的方法。

NSCLC中MET的改变也包括了激活突变和基因扩增两种。MET扩增已明确是EGFR突变型NSCLC患者靶向治疗耐药的机制。MET中14号外显子不同的剪切点突变已有描述，使得14号外显子跳跃缺失（skipping）。NSCLC患者中MET的14号外显子突变约为3%，且与年龄较大、分期较晚、组织学具有多形性有关。MET的14号外显子突变NSCLC患者有部分会对克唑替尼或卡博替尼（carbozantinib）有效。MET的14号外显子突变、MET扩增均与生存预后差有关。克隆号为SP44的c-Met抗体（SpringBio公司产品）免疫组化检测用于证实MET蛋白过表达已进行研究，但尚无明确的临床价值。尽管MET中14号外显子突变的NSCLC表现为和分期有关的MET扩增及c-Met过表达，但仅c-Met过表达并不能预测预后，且与MET突变状态之间相关性较差。

非小细胞肺癌诊断及预测性免疫组化指标概览（三）图8. 实性结构为主的低分化肺腺癌，免疫组化MET表达强阳性。