稍有经验的病理专业人士都会有一个清晰的概念：免疫组化指标，一般刚发现的时候，会对某类病变或肿瘤具有较好的特异性；但随着应用的增加，逐渐会在更多组织发现有相应表达。最近，德国病理专家Jansen在《Pathol Res Pract》杂志发表文章，报告了其在一万五千余例肿瘤标本中对DOG1免疫组化表达的研究结果。为帮助大家更好的了解相关问题并指导临床实践，我们将该文要点编译介绍如下。

简介

发现于胃肠道间质瘤的DOG1是一种门控钙离子活化氯离子通道和碳酸氢盐通道，其编码基因是位于11q13的ANO1基因。该蛋白在胃肠道中的Cajal间质细胞高表达，从而在上皮氯离子排出、介导肠道活性方面发挥重要作用。正因为这是一种门控钙离子活化氯离子通道，因此用于治疗关节和肌肉疼痛钙离子活化性氯离子通道阻断药（如niflumic acid）也会对肠道活动产生影响。对于癌细胞来说，阻断DOG1的药物（如CaCCinh-A01、T16Ainh-A01、曲妥珠单抗和/或西妥昔单抗）可以降低细胞增殖、导致G1期细胞周期阻滞、降低细胞活性、降低pEGFR和HER2表达、降低全细胞的氯离子传导性、提高凋亡率。

临床实践中，DOG1高表达是胃肠道间质瘤的诊断指标之一：胃肠道间质瘤中GIST的阳性率65-100%不等，可以说是这一瘤种最特异的指标。不过，随着应用经验的增多，很多其他肿瘤也可见DOG1的表达，具体如嫌色细胞肾细胞癌、平滑肌瘤、滑膜肉瘤、前列腺癌、肺腺癌、结直肠腺癌、食管鳞状细胞癌、头颈部鳞状细胞癌。当然文献中报道的具体阳性率并不完全一致，结果不一致的原因可能和所用抗体、免疫组化方法、阳性判断标准方面的差异有关。为更好的了解DOG1在不同组织中表达的阳性率及相关意义，亟需大规模、标准化综合研究。有鉴于此，德国汉堡大学医学中心（University Medical Center Hamburg-Eppendorf）病理专家Jansen等人在一项研究中，通过组织微阵列对来自121种肿瘤、一万五千多例标本及76种非肿瘤组织的标本进行了DOG1的免疫组化检测，相关结果已发表于《Pathol Res Pract》杂志。

研究内容及结果

该研究中纳入的肿瘤标本具体有121种、15965例，其中有详细组织病理学数据和分子检测数据的为：乳腺癌（n=1002）、膀胱癌（n=975）、卵巢癌（n=469）、子宫内膜癌（n=173）、胃癌（n=233）、甲状腺癌（n=512）。纳入研究的正常组织来自76种不同组织共计608例。更多临床信息及标本制作和免疫组化检测信息，请参阅原文。免疫组化结果的判读方面，根据阳性细胞比例、着色强度进行半定量记录，即0、1+、2+、3+；为便于统计学分析，又将免疫组化结果细分为四组，即：无着色时为阴性，着色强度为1+、阳性细胞比例≤70%以及着色强度为2+、阳性细胞比例≤30%时为弱阳性，着色强度为2+、阳性细胞比例31-70%以及着色强度为3+、阳性细胞比例＜30%时为中等阳性，着色强度为2+、阳性细胞比例＞70%以及着色强度为3+、阳性细胞比例＞30%时为强阳性。

上述标本制作组织微阵列、进行免疫组化检测后，有13395例（84%）肿瘤标本的结果及500多例正常组织的标本可供解读和分析。无法解读的标本主要是因为：无明确肿瘤细胞，微阵列相应位置无组织。

正常组织中，DOG1主要表达于细胞膜，但偶见胞质的微弱着色。着色最强见于胃肠道Cajal间质细胞、精囊腺上皮和涎腺浆液细胞的胞膜顶端，而黏液细胞仅偶见胞质顶端的弱阳性着色。主要为胞质顶端呈弱或中度着色的情况，可见于胃的表面上皮和黏膜颈部细胞、胆囊上皮、结肠黏膜隐窝底部的杯状细胞（弱阳性）、输卵管上皮、乳腺的肌上皮细胞。附睾组织中，尾部的着色要强于头部。肝细胞、甲状腺滤泡细胞、胎盘的羊膜细胞在细胞膜有相当弱的着色，几乎看不到。部分标本中，部分内膜腺体和宫颈管腺体及内膜间质可见着色。

上述结果在克隆号为MSVA-201M和SP31的抗体中都是如此。不过，对于克隆号为SP31的抗体来说，睾丸的精母细胞也有着色。其他未见DOG1着色的组织有肌细胞、脑组织、睾丸、卵巢、角化型及非角化型鳞状上皮、尿路上皮、胆管、淋巴器官、骨髓、结直肠的表面上皮、胰腺、Brunner腺、肾脏、前列腺、肺、乳腺的腺泡细胞、甲状旁腺、垂体。关于正常组织的DOG1着色，部分代表性图像详见下图。

图1：克隆号为MSVA-201M的DOG1抗体在正常组织的着色：（左一）精囊腺的上皮，（左二）结肠肠壁的Cajal间质细胞，这两者为强阳性着色；（右二）肝细胞有部分细胞的细胞膜呈弱阳性，（右一）睾丸无着色。

图2：克隆号为SP31的DOG1抗体在正常组织的着色：在精囊腺（左一）、结肠（左二）、肝脏（右二）的着色与前述克隆号为MSVA-201M的DOG1抗体结果一致，但在睾丸的精母细胞有部分出现了强阳性着色（右一）。

对于肿瘤组织来说，有2094例（15.6%，n=13395）肿瘤组织出现了DOG1的细胞膜着色，具体为：406例强阳性（3%），411例中等阳性（3.1%），1277例（9.5%）弱阳性。121种不同的肿瘤类型中，有67种（55.4%）至少有局灶的弱阳性着色。阳性率较高的肿瘤类型有：胃肠道间质瘤（98%）、涎腺基底细胞腺瘤（77%）、胰腺导管腺癌（60%）、食管鳞状细胞癌（49%）、胰腺/壶腹部的腺癌（47%）。部分代表性图像详见下图。

图3. 癌组织中的免疫组化DOG1部分代表性结果：（A）胃肠道间质瘤中的强阳性；（B）平滑肌肉瘤中的中等程度阳性，（C）食管鳞状细胞癌、（D）胰腺腺癌、（E）乳腺非特殊类型浸润性癌中的强阳性。（F）胃腺癌中，侵入平滑肌内的癌细胞并无DOG1着色，但肌层中可见大量DOG1阳性的Cajal型间质细胞。

该文还对DOG1免疫组化结果和部分肿瘤的组织病理学特点、分子特点之间相关性进行了研究，具体涉及乳腺癌、膀胱癌、卵巢癌、子宫内膜癌、胃癌、甲状腺癌。研究结果表明，DOG1阳性基本和pT、pN、组织学分级无关，但和乳腺非特殊类型浸润性癌中的某些分子特征有关，具体如ER阳性（p<0.0001）、PR阳性（p=0.0265）、三阴表型（p<0.0001）。DOG1的表达与乳腺癌患者的预后无关（p=0.3921）、与肌层侵犯尿路上皮癌患者的预后无关（p=0.8240）。对于鳞状细胞癌来说，DOG1高水平表达和无HPV感染相关，这一点适用于全部的鳞状细胞癌（p=0.0008）和肛管的鳞状细胞癌（p=0.0279）。

图4. DOG1的表达在乳腺非特殊类型浸润性癌（左）和肌层侵犯的膀胱癌（右）中，并无预后意义。

小结

本文通过大规模研究表明，DOG1在很多类型的肿瘤中可见高表达。除大家所熟知的、DOG1阳性程度最高的GIST外，其他可以出现该指标阳性的肿瘤还有食管、胰腺、结肠的癌以及不同部位来源的鳞状细胞癌。多种肿瘤的相关数据表面，DOG1阳性并无预后意义。

更多细节，请参阅原文。

参考文献

Jansen K, Farahi N, Büscheck F, et al. DOG1 expression is common in human tumors: A tissue microarray study on more than 15,000 tissue samples. Pathol Res Pract. 2021;228:153663. 

doi:10.1016/j.prp.2021.153663