稍有经验的病理医师都知道，很多最初认为极为特异的免疫组化指标随着应用经验的增加，会逐渐发现其阳性表达范围越来越广泛。了解相关指标的少见阳性表达情况，有利于避免误诊误判。近日，布朗大学阿尔伯特医学院（Brown University Alpert School of Medicine）病理专家Lu Shaolei等人在《Appl Immunohistochem Mol Morphol》杂志发表文章，为大家呈现了PAX8在乳腺癌中阳性表达的相关结果。为帮助大家更好的了解这一问题，并避免实际工作中的误诊误判，我们将该文要点编译介绍如下。

简介

免疫组化PAX8细胞核阳性，被认为是肾癌、Mullerian来源的癌、甲状腺癌的特异性标记，因此临床实践工作中常用于鉴别Mullerian来源的癌及其他部位原发的癌，如乳腺癌。不过，PAX8抗体的交叉反应早有报道，尤其间皮细胞、胰腺细胞、B细胞。以前认为乳腺癌并不会表达PAX8，但最近有两项研究称乳腺原发的癌中也会有PAX8的异常表达，但其具体阳性比例等情况尚不完全清楚。有鉴于此，本文原作者尝试研究一组浸润性乳腺癌中PAX8的免疫组化表达情况，并在TCGA数据库中对PAX8信使RNA的表达情况进行了检索。

研究内容及结果

选择Lifespan医学中心的195例浸润性乳腺癌病理标本，根据对应的HE切片选择组织制作组织芯片，每例肿瘤选择4-5个代表性的组织芯及1-2个周围非肿瘤组织。另选71例乳腺浸润性癌常规切片病例一起进行分析。

研究中涉及抗体有ER、PR、HER2、GATA3、PAX8（两种不同克隆的抗体），具体抗体信息及免疫组化检测方案详见原文。

如上所述，总计195例组织芯片及71例常规切片供进一步分析。浸润性癌的组织学类型具体有导管癌234例（88.0%，其中8例伴实性-乳头状特征），小叶癌17例（6.4%），大汗腺癌5例（1.9%），黏液癌4例（1.5%），微乳头状癌3例（1.1%）。组织学分级而言，I级28例（10.5%），II级85例（32.0%），III级153例（56.8%）。其他免疫组化指标方面，ER阳性163例（61.3%），PR阳性152例（57.0%），HER2阳性38例（14.3%，也包括了CISH检测HER2阳性病例）。三阴表型的病例87例（32.7%）。

PAX8免疫组化阳性病例16例（6.0%），其中13例属于87例三阴表型病例中（15.0%）。所有PAX8阳性病例组织学均为III级浸润性导管癌。有9例为局灶阳性，7例为弥漫阳性。着色强度方面，12例为弱阳性，剩余4例为中等程度阳性（且其中3例为弥漫性）。未见细胞核强阳性表达PAX8的情况。

16例PAX8阳性病例中有13例（81%）为三阴表型。3例非三阴表型的病例中，1例为ER、HER2阴性而PR弱阳性，1例为ER、PR阴性而HER2弥漫性3+，1例为ER、PR阴性而HER2呈异质性表达（10%的肿瘤细胞为3+，其余90%的肿瘤细胞为1+）。HER2异质性表达的PAX8阳性病例中，HER阳性及阴性成分均可见PAX8的中等程度着色。组织芯片标本中的PAX8着色强度及着色方式具有100%的肿瘤内一致性。组织芯片标本中未见非肿瘤性乳腺导管及小叶，而常规切片病例中所见非肿瘤性乳腺导管及小叶均为PAX阴性。

图1. （左）组织芯片中PAX8阴性表现，其中着色的为肿瘤内浸润的淋巴细胞；（中）组织芯片中PAX8弱阳性表现；（右）常规切片中PAX8弱阳性表现。

合计266例中，有212例具有GATA3免疫组化结果，其中16例PAX8阳性病例中有10例具有GATA3免疫组化结果：3例（30%）为GATA3阴性。

进一步分析PAX8阳性结果，4例中等程度着色病例中有1例为59岁女性、乳腺常规X线检查出4.9cm肿物行活检，组织学为III级三阴型浸润性导管癌。除乳腺肿物外，该患者子宫内膜活检证实有FIGO分级I级的子宫内膜样腺癌。两处病变均行免疫组化PAX8检测，子宫内膜肿瘤为弥漫强阳性，而乳腺肿瘤为中等程度阳性。此外，GATA3在乳腺肿瘤为阳性而子宫内膜样癌为阴性。根据上述免疫组化结果及形态学所见，最终证实该患者既有原发子宫内膜样癌，又有PAX8阳性的乳腺原发癌，二者并无关联。本例也表明根据PAX8阳性而排除乳腺原发肿瘤的时候可能会有陷阱，对于疑难病例一定要采用一组免疫组化指标才可以。

图2. 文中所述伴子宫内膜腺癌的三阴性乳腺癌病例：第一行为乳腺癌，第二行为子宫内膜腺癌；第一列为形态学所见，第二列为免疫组化PAX8，第三列为免疫组化GATA3。

表达神经内分泌标记的肿瘤一般会有多种器官特异性标记的非特异性着色。本研究在14例表达神经内分泌标记（CgA和/或Syn）的乳腺癌中检测了PAX8的表达情况，均为阴性；且前述16例PAX8阳性乳腺癌中无一具有神经内分泌组织学特征。

进一步在相关数据库中检索乳腺癌PAX8 mRNA水平及不同肿瘤中的PAX8表达情况。总计检索出8207例供进一步分析，其中乳腺癌5761例（67.6%），卵巢癌617例（7.2%），甲状腺癌633例（7.4%），子宫内膜癌549例（6.4%），肾癌944例（11.1%）。具体来说，Mullerian来源的癌、甲状腺癌、肾癌中PAX8 mRNA表达水平最高；乳腺癌中PAX8 mRNA主要呈较低水平表达。散在的PAX8中等程度表达罕见病例中，其临床特征提示为高级别浸润性乳腺癌。

图3. TCGA数据库中检索出8207例癌病例的PAX-8表达情况。由左至右分别为乳腺癌、卵巢癌、甲状腺癌、子宫内膜癌、肾癌（依次为透明细胞肾细胞癌、嫌色细胞肾细胞癌、乳头状肾细胞癌）。由该图可见，PAX8表达最高的情况见于Mullerian源性的癌、甲状腺癌、肾癌，乳腺癌中有少部分会出现异常表达。

小结

本研究结果表明，浸润性乳腺癌中PAX8的阳性率为6%，且PAX8阳性乳腺癌均为高级别、ER阴性（或三阴表型）肿瘤。PAX8阳性乳腺癌中，其着色模式为细胞核弱着色，罕见情况下可为中等程度着色。总之，仅PAX8阳性不能用作排除原发乳腺癌的指标，尤其是弱阳性着色的情况下；这种情况下应结合其他临床及病理特征来做出准确诊断。

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参考文献

Lu S, Yakirevich E, Hart J, Wang L, Wang Y. PAX8 Expression in Breast Cancer. Appl Immunohistochem Mol Morphol. 2020;10.1097/PAI.0000000000000883. 

doi:10.1097/PAI.0000000000000883