术中快速病理，也称术中冰冻，是手术室与病理科的冰雪奇缘。

术中快速有啥用？

同一个器官的不同疾病，即使都要进行手术，手术的范围也是不一样的。只有当患者确诊为癌症时，外科医生才能实施相应的“癌症手术”。

之前我们曾经讲过，癌症确诊需要病理检查，也就是在肿瘤上取一点样本，放在显微镜下观察。

为了取这些样本，医生们想了各种办法，既要将身体损害降到最低，又要将医疗器械探入体内取样 。我们熟悉的胃镜就是其中之一。

胃镜概念图

但是……

不是所有病变都能通过内镜、穿刺这样的手段取出来检查。这时候怎么才能确定是不是要进行“癌症手术”呢？

我们还曾经讲过，手术室切下来的病变，也会送到病理科进行病理检查。其中有一项检查内容，就是病变到底有没有“切干净”（详情请点击：我从手术室切下来的肉，你们拿去做了什么？）。

但是……

手术都做完了，就算知道“没切干净”，岂不是只能亡羊补牢了？为什么不能手术期间就检查一下切缘呢？

术中快速冰冻，就是解决这些问题的一项检查。听名字就知道，它的特点就是“快”。

有多快呢？通常可以在30分钟内给出检查结果。

有了这项技术，手术前无法确定手术范围的患者，可以先进行手术，在手术室取出样本送到病理科，在手术室等待30分钟得到结果后，当场决定手术范围。

需要在手术中确定是否切干净的患者，也可以在手术间等待30分钟，假如真的没有“切干净”，还可以继续手术扩大切除范围。

可以说这30分钟，是世界上最漫长的30分钟了。在这30分钟内具体发生了些什么呢？

电视剧里术中快速冰冻检查的过程（来自日剧《Fragile》）

是不是看花眼了？我们来分解步骤。

术中快速 咋弄的？

手术室切下的人体组织送到病理科，依然需要先“取材”。为了保证速度，通常一处检查部位只取1-2块标本。

既然叫术中快速冰冻，那除了“快”，就是“冷”了。

以前我们也讲过，想把人体组织切成几微米厚的薄片，直接切软趴趴的肉是不行的。

就算切涮羊肉片，也得先冻一冻再切不是？

也不知道是不是受了中国涮羊肉的启发，总之呢，一百多年前，西洋人发明了用于病理检查的冰冻切片技术。

冰冻切片和石蜡切片一样，要想切，先得制成“块”。

切羊肉片也要先制成“羊肉块”。图源网络。

不管是石蜡切片还是冰冻切片，“制成块”这个步骤，主要靠的就是“包埋”。

石蜡切片是用石蜡制成“蜡块”，冰冻切片是用水制成“冰块”吗？

还真不是。冰冻切片反而不能碰水，水在冷冻时形成的冰晶，会十分影响切片的质量，对细胞和组织的形态产生破坏，极大地干扰病理医师的诊断。

真要说起来，冰冻切片的“冰块”，外形有点像“雪糕”。再说了，“雪糕”也应该比“冰块”好切啊！

冰冻切片所用的包埋剂，通常使用OCT包埋剂，是一种聚乙二醇和聚乙烯醇的水溶性混合物，长得有点像胶水。特点就是好冻，好切，溶于水。

这种胶水可不便宜。

上图就是OCT包埋剂涂到组织托盘表面，放入冰冻切片机后，迅速冷冻的过程。

速度快得像被爱莎施了魔法。

要问切片机里温度是有多低，这可是门学问，不同组织需要的温度是不一样的。不过大致倒也没多低，反正不如东北最冷的时候冷（最多打个平手？）。

如果直接在冰冻切片机里涂这种“胶水”，效果是酱婶儿的：

这里涂完以后还放上了需要制片的组织

速冻完成以后，就要切片和贴片了。贴片就是把切好的薄薄一层组织，贴到玻璃片（载玻片）上。

这需要经验丰富的病理技术员完成。

具体是怎么做的？憋说话，看图：

切片和贴片

贴好的切片需要立刻放入固定液里固定，时间通常不超过1分钟。

这时，载玻片上的组织切片几乎是透明的，想在显微镜下看清楚，需要染上色。染色方法与常规石蜡切片大致上相同，都是HE染色。

染色完成后，滴加树脂胶用盖玻片覆盖，就是呈现在病理医师面前的冰冻切片了。

听起来很复杂，实际上这个过程只需要10分钟左右的时间。

术中快速万能吗？

有了这么酷的技术，我们还要石蜡切片干啥？都去做冰冻好了呀！

很遗憾，并不能。术中冰冻仅仅是一个粗略的判断，远远无法代替慢工出细活的石蜡切片。

前面我们提到过，为了保证速度，一处检查部位通常只取1-2块标本制片。但是很多肿瘤有一种叫做“异质性”的特点。说白了就是同一块肿瘤，不同的区域长得还有可能不一样。

当然了，除了有可能长得不一样，还有很多其它不一样的地方，我们在这先不做讨论。

那么问题来了，医生只能尽量选择从外表看起来最具有代表性的区域进行制片，但仍然有时取不到最典型的区域。

那我不图你30分钟出结果，我等俩小时，你多取一些，我慢慢等总可以了？总比石蜡切片等好几天强啊！

很遗憾，冰冻切片的制作方式较为简略，还会导致镜下形态存在一些假象。术中快速冰冻的诊断，也需要更高素质的病理医师。

我们前面说过，水在冷冻时形成的冰晶会影响诊断，所以不能用水进行包埋。但是有些人体组织本身就含有大量水分，在进行冰冻切片诊断时就会受到限制。

冰晶形成

冰冻切片还可能会造成组织过度收缩，给诊断造成困难。冰冻处理后的细胞会出现体积胀大、拉长、细胞内空泡等变化，细胞核也会产生一定的变形。

还有很多疑难病例，即使是石蜡切片都极难确切诊断，仅凭冰冻切片更无法诊断明确。况且我们之前介绍的免疫组化技术，尚未广泛应用于冰冻切片。

国内外报道的术中冰冻诊断准确率在97%左右，是存在一定风险的，而且不能完全避免。

还有一点就是，由于成本较高，冰冻切片较常规石蜡切片的单价更昂贵，对于需要制作大量切片的恶性肿瘤患者来说，会造成更大的经济压力。

权衡利弊怎么办？

术中快速冰冻的局限无法避免，然而对于一些患者手术范围的选择起到决定性作用。

于是对于需要做术中冰冻诊断的患者，通常采取这样的方式：

对于送检的快速冰冻标本，医生取所需检查的1-2块组织进行冰冻切片。

另取更多的病变组织，制作蜡块进行石蜡切片。

对于冰冻后的那1-2块组织，切片诊断后也会制作成蜡块，其切片称为“冰冻剩余”切片。

手术中，病理医师对冰冻切片进行大致诊断，手术医生根据这个诊断做出手术方案的选择。

手术后，用几天时间对石蜡切片和冰冻剩余切片进行细致观察，复核术中诊断，并且做出更细致的诊断。

快速冰冻往往止步于判断手术方式，而这个更细致的诊断往往可以得到更多的信息，比如判断患者的预后，指导术后的辅助治疗等等。

还有一些通过冰冻切片无法做出诊断的病例，更要等待术后的石蜡切片才能决定下一步是否还需要二次手术。虽然二次手术会造成一定的负面影响，但是术中冰冻也并非万能，这一点是一定要清楚的。

总结起来就是这样：

好了，以上就是关于术中快速冰冻诊断技术的全部介绍。

参考资料：

1.杨秀静,滕孝静.冰冻切片技术经验探讨[J].临床和实验医学杂志,2014,(23):2002-2004. 

2.田柯,杨云滨,等.实施术中冰冻病理风险告知的可行性探讨[J].中华医院管理杂志,2005,21(5):328-330. 

3.Gal AA. The centennial anniversary of the frozen section technique at the Mayo Clinic[J]. Arch Pathol Lab Med. 2005;129(12):1532‐1535. 

4.Edgerton ME, Roberts SA, Montone KT. Immunohistochemical performance of antibodies on previously frozen tissue[J]. Appl Immunohistochem Mol Morphol. 2000;8(3):244‐248. 

5.Anton RC, Wheeler TM. Frozen section of thyroid and parathyroid specimens[J]. Arch Pathol Lab Med. 2005;129(12):1575‐1584. 

6.A practical guide to frozen section technique[M]. Springer Science & Business Media, 2010.

动图来源：

Youtube-

@CIMS Hospital-Upper GI Endoscopy (Hindi) - CIMS Hospital

@Abnova-H&E Staining

@Harsha Vardhan-Sectioning of Frozen Tissues

@Biology Department-Cryostat Tutorial

@Motherboard-Frozen Faith: Cryonics and The Quest to Cheat Death