作者：赵丽辉，冷东明，孙振柱(新疆维吾尔自治区人民医院病理科)
病理常规制片技术是病理诊断的基础，切片质量是指导医师作出准确诊断的重要保证。在切片时，我们会遇到许多问题，如：粘刀，裂痕，皱褶，卷片，破碎等，这都会影响到切片的质量和速度，从而耽误出片时间。我们在日常工作中根据不同组织总结出了一些经验和体会，现与同行交流。
1、淋巴结组织
①淋巴结组织具有结构致密，细胞丰富等特点[1]，取材时切取的组织厚薄要均匀，一般以0.2～0.3cm为宜。②淋巴结都有一层比较致密的结缔组织被膜，不利于液体与这些组织的相互渗透，固定时间需延长6～12h，可固定一夜，第二天与常规组织一起进行脱水。如用中性甲醛固定和乙醇脱水，时间都要延长一倍，可适当缩短二甲苯透明时间。③在切片过程中，要求的组织厚度在2～3μm，故切片组织易碎，展片时皱褶不易打开、有裂隙、不平整，这时蜡块不易冻得过久，冻后的蜡块修到最大面时用拇指沾温水捂5～6s后快速用冰块冰3～4s立即切片，这样切出的片子既完整，又无裂隙，且连片。④展片时水温在35℃左右即可，过高，小皱褶打不开；过低，切片不平坦，贴片不牢易脱片。⑤染苏木精时应比常规时间短，一般3～5min即可，也可以单设置一种染色程序专门用于淋巴结等实性组织的染色。
2、脂肪组织
脂肪组织内充满脂肪滴，不易被脱水剂完全溶解，石蜡也不能完全浸透，故组织不能被固定。固定的作用就是使组织硬度增加便于制片。因此，固定和浸蜡时间相对延长是关键，取材也不宜过厚，切片时修至最大面后，用冰块贴到蜡块上冰5～10s后再立即切片，低温可暂时使未脱透的脂肪滴凝固，这样就可以切出较完整的组织。切片厚度可调整为5～6μm，裱片和捞片速度要快，裱片温度不易超过42℃。
3、骨髓及骨组织
在骨髓及骨组织制片中脱钙是关键。骨髓组织常采用7%盐酸水溶液脱钙，因送检的骨髓组织硬度不同，所以时间很重要。时间太短组织较硬，切片时不连片；时间太长组织发灰影响诊断。骨髓组织在脱钙液中漂起即可，一般为2～5min。骨组织在切片前也要经脱钙处理，我们常用的脱钙液是17%硝酸水溶液，时间为12～24h，或用大头针能扎透为准。切片前蜡块一定要慢修、薄修，尤其对较薄的骨片，这样切片时骨组织不会被切掉；烤片时间要相对延长，以防脱片。
4、凝血块
凝血块经脱水后组织较干，切片时易成碎沫，不完整，因此为提高速度，切片前可用拇指沾温水在组织最大面上捂几秒钟，将蜡块后退一点再快速切片；烤片时间要延长，以防脱片。
5、皮肤组织
皮肤组织结构复杂，层次多，且各层之间的组织致密程度各不相同，可相对延长脱水时间。包埋时皮肤及皮下组织要包在同一个面上，这样才能切出皮肤的层次。切片时要将蜡块内皮肤组织表层朝上夹在切片机夹口上，按照皮肤组织的特点由里至外，最后切角质层，这样才可制作出比较完整的切片。因角质层密度最大，易碎。烤片时间可相对延长防止脱片。
6、脑组织
脑组织结构疏松、组织较少，质软易碎。一般组织取材厚度<2mm，组织脱水不好会影响浸蜡，可适当延长脱水时间，脱水后较脆，包埋时要轻夹轻放不能重压，以免将组织压碎。切片时容易粘刀、皱褶不易打开，因此，要在冰箱冻的时间长一些，切片方法同淋巴结组织。展片时可先放在凉水中将小皱褶完全打开，再用载玻片移到展片机中充分展片。烤片时间不宜过长。
在切片过程中，还应注意以下几点：
①使用新刀片时应尽量先切小组织或淋巴结等实性组织，后切脂肪、肌肉等组织，最后切骨组织；
②修蜡块与切组织不要在同一个刀位，在一边修好蜡块后移到另一边切片，这样既省刀又能保证质量；
③烤片前最好将刚捞起的切片靠在烤片机边上，控水后再烤片，否则水会将组织推散，破坏其完整性；
④自动化机器可按设置要求恒定制片工作中温度、时间、程序，避免手工操作中的不稳定因素；
⑤一张优质病理切片的固定、脱水、包埋、切片固然重要，但这些步骤保障的是所用试剂的稳定性，我们由专人进行试剂的检查、配制、更换和调整，对试剂的浓度。剂量、使用时间、稳定性等都按时记录，以保证质量。
参考文献：
[1] 王德田，罗玉凤，曹金伶，等。如何制作精良的淋巴组织切片[J].诊断病理学杂志，2005，12（4）：314.
[2] 凌启波，梁英杰。HE制片质控要求[J].临床与实验病理学杂志，2000，16（4）：333-334.
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