[导读] 编译整理：强子
免疫组化p53的表达模式
作为肿瘤抑制因子来说，TP53是比较特殊的，因为其大量突变是错义突变。其他肿瘤抑制因子中，大部分突变都是移码突变或无义突变，会导致蛋白表达的完全缺失，具体如BAP1、SMAD4、ATRX。TP53的错义突变导致蛋白构型改变，因此其半衰期延长；这种构型的改变会掩盖正常泛素化的位点，因此蛋白无法通过蛋白酶降解。相反，野生型p53的半衰期相对短，估计为10-20分钟，已经进化为能够对细胞应激做出动态反应。
免疫组化p53主要有三种表达情况：错义型，null型，野生型。详见表1。
表1.免疫组化p53表达模式
图1.免疫组化p53表达的主要模式，具体包括无义突变模式、null模式、野生型模式。本图所有照片均来自一例Barrett相关异型增生的内镜下黏膜切除标本。（A）错义突变模式，也称为过表达模式；表现为弥漫、强阳性着色，掩盖了细胞核的细节；不同器官系统中的错义突变模式判断有不同的阈值，详见表1；（B）null模式，也称为缺失模式，表现为完全不着色，而背景为野生型着色，可作为内对照；（C、D）野生型模式，表现为比null模式强、但比错义模式弱的任意程度细胞核着色；其着色程度从弱至强均可，与增生程度相对应。图（C）中，鳞状上皮基底层为强于下方柱状上皮的野生型着色；图（D）中，食管黏膜下腺体中散在单个弱阳性的细胞。
图2.本例为肺的低分化神经内分泌癌转移至肝脏，免疫组化p53为胞质着色，仅散在细胞核有着色。胞质着色的模式一般是TP53细胞核定位结构域突变所致，少见情况下见于四聚体化结构域的突变、或细胞核排除序列（nuclear exclusion sequence）的突变。不过，本例确定有TP53的DNA结合结构域突变I254fs，变异等位基因频率90%。
图3.本图示外阴鳞状上皮病变中p53免疫组化的独特模式。（A）少数（约5%）分化型外阴上皮内肿瘤会呈基底层过表达模式，及基底细胞>80%表现为强阳性着色；这一模式与TP53突变有关，且可能是终末分化现象的表现；（B）相邻非病变的鳞状黏膜表现为散在、弱着色的野生型模式；（C）高危型HPV介导的鳞状细胞病变呈基底层不着色、中层上皮完整着色的模式，这可能反应了E6致癌蛋白介导的p53降解；（D）本例分化型外阴上皮内瘤变，p16免疫组化呈异质性着色；（E）相邻鳞状黏膜中的p16免疫组化不表达；（F）高危型HPV介导的病变中，p16免疫组化呈团块状着色。
图4.不确定着色模式，偶有病例会表现为这样的免疫组化结果。（A）本例为10余年来经过多线治疗的神经内分泌肿瘤肝转移患者，具体如单纯栓塞、肽受体放射性核素治疗、卡培他滨/替莫唑胺治疗；本例Ki-67增殖指数为42%；（B）免疫组化p53呈中至强阳性，但着色的细胞核数量要比一般常见情况下少；本例送二代测序，结果表明有TP53的R280T突变，变异等位基因频率50%。
图5.终末分化情况下的免疫组化p53。具有错义突变着色模式的TP53突变型上皮性肿瘤中，其表达常存在从基底到表面的逐渐减少。图中为炎症性肠病相关异型增生的免疫组化p53染色实例。这种终末分化现象也见于野生型着色模式，如null模式，不要评估为表面上皮的不着色，具体如Barrett食管或炎症性肠病时。TP53突变的骨髓增生异常综合征中，成熟髓系成分也并无p53的过表达，可能是终末分化的另一种表现。
图6.免疫组化p53质控。（A）结肠癌中的错义突变表达模式；这是本文原作者所在实验室用于阳性外对照的，从对照的角度来说是错误的；一般来说，低水平表达的阳性组织对照要优于高水平表达的阳性组织对照。（B）本文作者所在实验室用于多项免疫组化检测的多个组织对照，具体包括扁桃体、结肠等；建议用低表达的标本做对照；（C）扁桃体隐窝上皮中，有野生型的弱阳性着色；在生发中心细胞中也有罕见着色；（D）本图结肠隐窝中，无p53着色；其实隐窝基底部应散在着色细胞。这种无着色的情况可能提示固定欠佳，但也可能是检测体系未达到最优状态的提示。大部分未达到最优状态的p53免疫组化检测中，都会有阳性信号、但太弱，这时可能会难以区分null型着色和野生型着色。
——未完待续——
往期回顾：
病理检测指标p53大揭秘（一）
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